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当患者由于各种不适做了胃镜检查并咬取少量组织后,最终会收到一份病理诊断报告,报告中常有一些英文标识,例如:AB、PAS等字样,这是什么?又有哪些意义呢?今天我们就来聊聊病理诊断中常用的一种技术——特殊染色技术。
所谓特殊染色是相对于常规染色而言的。病理医师是通过对切片上细胞和组织结构的观察,寻找异常成分为基础做出病理诊断的,然而常规切片后细胞是无色的,我们需要先对它进行染色,最广泛使用的就是HE染色。HE染色是根据使用的2种染料——苏木精(hematoxylin)和伊红(eosin)的英文首字母命名的。苏木精可以把细胞核染成蓝紫色,而伊红将细胞质染成红色,蓝紫色和红色形成了鲜明的对比,可以清晰显示组织和细胞的形态结构(图1)。该染色方法是由Bohmer和Fischer首次在1875年用于病理组织切片染色的,至今已有145年历史。日常工作中每一张病理切片均需要做HE染色,但是还有一些物质是HE染色观察不到的,此时就要用到其他的染料和技术,这就是我们所说的特殊染色。
图1 .胃窦活检组织 HE染色,x10倍
特殊染色有很多种类型,需要根据不同目的去选择,我们一般在胃镜活检病理诊断中常用到4种,分别是诊断胃幽门螺旋杆菌有无的吉姆萨染色(Giemsa)以及诊断肠上皮化生类型的爱先蓝(AB)、过碘酸雪夫(PAS)和高铁二胺(HID)染色。
幽门螺杆菌(Helicobacter Pylori,HP)是一种可以通过水、食物或餐具进入人体后居住在消化道的细菌,它会攻击保护胃壁免受损伤的胃黏膜,从而造成溃疡或其他疾病。自从1982年被发现以来,越来越多的证据表明HP与胃癌的发生密切相关。因此,如何在伴有炎性改变的胃活检标本中快速、正确地检出HP十分重要。我们常使用Giemsa染色方法来实现。染色后的HP在高倍镜下呈蓝色,细菌形态清晰,易于辨认,主要位于胃小凹及黏膜表面,常见于糜烂或溃疡周围黏膜(图2)。根据细菌量的多少和分布,又可进一步分为轻、中、重三级。检出HP后应及时遵医嘱进行治疗,可有效降低胃癌的发生。
图2 .胃窦活检组织吉姆萨染色,HP阳性,x 40倍
在HP等各种不良因素刺激下,胃黏膜上皮受到损伤,在损伤处长出了正常肠道(小肠或大肠)黏膜才有的细胞,这个过程叫肠上皮化生,简称“肠化”。正常胃黏膜上皮分泌中性黏液,小肠或大肠的黏膜除了分泌中性黏液外,还可以分泌酸性黏液,后者又分为硫酸和唾液酸黏液。如果把正常的胃黏膜比喻成一片苹果林,肠化后的胃黏膜就是苹果林中部分苹果树被梨树取代。根据肠化细胞的形态及分泌黏液的不同,可以把肠化分为4种类型:完全小肠型、不完全小肠型,完全大肠型以及不完全大肠型化生。由于中性和酸性黏液在HE中都均呈淡粉色,无法区别,因此需要特殊染色来鉴别。AB染液可将酸性黏液染成蓝色,PAS染液使中性黏液呈红色,HID染液使硫酸化黏液呈棕黑色。这三种染色法的意义在于AB-PAS染色可以区分酸性黏液和中性黏液物质,HID染色可进一步区分酸性黏液中的硫酸黏液及唾液酸黏液,根据染色结果可以判断黏液成分和肠化类型(表1,图3)。肠化可见于各种胃良性病变及胃癌癌旁组织中,不完全大肠型肠化与胃癌的发生关系最为密切。但肠化是一个漫长的过程,长达几年甚至几十年。故发生胃肠上皮化生不必恐慌,首先可以根据特殊染色结果进行分类,随后进行对症治疗,一般在初期使用药物治疗是可以逆转的。
表1. 四种肠化的细胞种类、分泌黏液以及特殊染色结果
图3. 胃窦活检组织 A. AB染色阳性 B.PAS染色阳性 C.HID染色阳性,x10倍
由此可见,特殊染色技术在胃镜病理诊断中具有举足轻重的作用,可以帮助我们快速有效寻找细菌和进一步分辨细胞类型,不仅可以为临床医生提供更充分的治疗依据,同时可以筛选出特殊患者进行必要的治疗和随诊,从而防患于未然。
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