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鑫冉生物介绍病理切片与制片方法
更新时间:2020/11/26   浏览量:1144
  一张优质的病理切片是病理医生作出正确诊断的前提。在日常病理工作中,由于各种不同原因往往导致病理切片质量低劣,造成诊断医师镜下诊断困难。切片制作是一个连续复杂的过程,各个环节都至关重要。要做好一张切片,就要在每个环节上下功夫。根据各个环节对制片的影响,提出相应的处理办法。

标本固定要充分及时

标本固定是制片的首要因素。如不及时充分固定,组织会发生干缩变硬,甚至自溶,直接影响病理诊断。正确的固定方法是:组织离体后立即放入固定液中,固定液的量要足(固定液一般为标本体积的10倍),容器视标本大小而定,使标本放入后不会变形。对于较大的标本可沿其最大切面剖开后再固定。

标本取材应规范

标本充分固定后即可取材。小标本一般全部制片,大标本应在病变部位、病变部位与正常组织交界部位多处取材。所取组织块应形状规则,大小适中,薄厚一致,一般为1.5cm×1.5cm×0.2cm。对于一些组织的取材可灵活掌握,对质硬韧的组织可取薄一些,骨组织的取材应在脱钙充分后进行,用大头针轻扎骨组织可穿入即可。取材切忌用力挤压,否则组织受压变性。

切片制作

试剂更换应及时

取材后的组织在处理过程中,各道、各类试剂均可挥发,导致试剂浓度降低;或在试剂中混杂其他试剂或组织碎屑,因而影响组织的脱水、透明、浸蜡或造成组织的污染,甚至产生误诊。因此,应根据标本量的大小定期更换或观察组织处理情况,分析原因,更换相应试剂。

组织的包埋与切片碎组织,应包埋在同一平面,包埋时可用热镊子将预制好的蜡块表面熔化,将碎组织全部包埋在同一平面,待表面初凝,立即用平滑的金属板轻压片刻,使组织更平整。小块组织应呈线状包埋;大块组织应在包埋时将其压平,防止出现切片不完全及片内组织杂乱无章的情况而造成误诊。切片前应将刀磨锋利,防止切片断裂,破碎。蜡块切片机应固定好,防止损伤切片刀及组织块。切片一定要完整,不仅要将每块组织切出,而且要切到最大面,防止发生漏诊。捞片前可在载玻片上涂上50%蛋白甘油,防止脱片。

染色、封固要细心

切片在烤箱内烘烤一般需要65℃30min左右。温度过低,时间过短时组织脱蜡不全,染色易发生脱片或不上色;温度过高,时间过长,组织易发黑,染色不清。染色过程中盐酸乙醇的分化很关键。如果分化不足,切片呈现一片蓝染,而且影响伊红上色;分化过度时,则细胞核着色过淡,此时可适当延长温水中返蓝时间。切片封固应在切片上二甲苯未干时,以防止出现色素。

要提高石蜡切片质量就要规范、认真地做好制片的各个环节,并且在实践中不断摸索、总结、创新,这样才能为病理诊断提供有力的技术保障。


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